摘要：目的 研究人脐带间充质干细胞（MSCs）详细的生物学特性,包括其细胞形态、免疫表型、纯度及增殖能力,从而建立稳定的MSCs体外分离培养体系。方法 将剔除动静脉及内膜的新鲜人脐带组织剪切成1mm3小块,用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养,得到贴壁细胞。观察贴壁细胞形态,利用CCK-8试剂盒测定生长曲线,流式细胞术研究特殊细胞表面抗原CD29、CD73、CD90、CD105、CD31、CD14、CD34、CD45、CD11b、HLA-DR表达,并检测细胞周期。结果 体外培养7~10d后,可见细胞从组织块中游出;细胞主要呈纺锤体样、成纤维细胞样形态;生长曲线显示其增殖能力强;特殊表面抗原CD29、CD73、CD90、CD105表达强阳性,造血性抗原标志CD31、CD14、CD34、CD45、CD11b、HLA-DR表达均呈阴性,流式细胞仪周期检测结果显示G0/G1期细胞超过80%。结论 利用组织块法可有效获得人脐带MSCs,具有高纯度、低成本优点,并在体外较易培养、扩增。

关键词：流式细胞术 人脐带间充质干细胞 培养 分离 组织工程 

单位：兰州大学第二医院血液内科 兰州730030 兰州军区兰州总医院血液科/全军血液病中心 兰州730050