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利用分子信标检测microRNA并成像肺癌干细胞的实验研究

朱海振; 耿涛; 李雪涛; 林盛; 韩静; 江飞龙; 陈光朋; 谭诗生; 陈正堂 重庆医学 2016年第15期

摘要:目的利用miR-155分子信标(MB)检测CD133+CD326+肺癌干细胞(LCSCs)中高表达的miR-155并成像肺癌干细胞。方法采用对A549细胞逆向诱导及紫杉醇富集的方法,通过流式细胞仪从A549细胞中分选出CD133+CD326+细胞,并对其干性进行鉴定。以壳聚糖纳米(CS)作为载体转染miR-155 MB,激光共聚焦显微镜检测miR-155 MB对LCSCs中miR-155的识别功能并成像,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进一步验证。结果分选的CD133+CD326+细胞在干细胞培养基中成球生长,干性相关基因CD133、CD326、OCT-4、Nanog表达为A549细胞的3.27、3.39、6.01、3.42倍(P〈0.05),在细胞数为1×104数量下仍具备成瘤能力。CS转染miR-155 MB后在A549及LCSCs中均可看到较强的红色荧光,以LCSCs中荧光信号最强(P〈0.05),且荧光信号强弱趋势与qRT-PCR检测的miR-155的表达趋势较一致。结论利用miR-155 MB能够检测LCSCs中高表达的miR-155并使其成像,为监测并发现肺癌干细胞提供新思路。

关键词:肿瘤干细胞肺肿瘤a549分子信标

单位:贵州省人民医院肿瘤科; 贵阳550002; 第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所; 重庆400037; 泸州医学院附属医院肿瘤科; 四川泸州646000

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