摘要：目的探索半乳糖凝集素-3（Gal-3）联合肝细胞生长因子（HGF）诱导大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）向肝样细胞分化的可行性及最佳诱导条件,并对诱导后的细胞进行鉴定。方法离心、贴壁培养分离大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定表面标志。取第3代细胞进行分组诱导培养,A组：0μg/mL Gal-3＋20ng/mL肝细胞生长因子（HGF）;B组：0.1μg/mL Gal-3＋20ng/mL HGF;C组：0.5μg/mL Gal-3＋20ng/mL HGF;D组：1.0μg/mL Gal-3＋20ng/mL HGF;E组：2.0μg/mL Gal-3＋20ng/mL HGF;阳性对照组：SD大鼠肝脏细胞IAR20。分别于诱导后7、14、21、28d时段进行细胞形态学观察、免疫荧光染色检测、实时荧光定量核酸扩增检测（Q-PCR）鉴定其诱导分化情况。结果分组诱导培养后,各组BMSCs形态逐渐向肝样细胞转化,与大鼠原代肝脏细胞IAR20相似,其中28d时间段,C组转化成IAR20相似细胞比例最高;各组甲胎蛋白（AFP）、清蛋白（ALB）荧光染色阳性率明显增高,并且在28d时间点C组AFP、ALB的荧光染色阳性率最高;C组AFP、ALB mRNA表达明显增加,同时以28d时间点表达量达到峰值。结论 Gal-3联合HGF能有效诱导大鼠BMSCs分化为肝样细胞,分化后的肝样细胞能分泌肝细胞特异性产物AFP、ALB,且其诱导效率与诱导培养时间和Gal-3浓度有关。

关键词：间质干细胞 甲胎蛋白类 肝细胞生长因子 骨髓间充质干细胞 诱导 

单位：南方医科大学珠江医院肝胆二科/“器官衰竭防治”国家重点实验室/“器官衰竭防治”协同创新中心/广东省人工器官与组织工程研究中心; 广州510282; 云南省普洱市人民医院肝胆外科; 665000