摘要：目的 比较角膜缘干细胞（LSCs）在不同羊膜上的生长情况,寻求LSCs体外培养的最佳载体。方法 取健康剖宫产孕妇胎盘的羊膜组织,分别制备保留上皮的新鲜羊膜、去除上皮的新鲜羊膜和冷冻羊膜。消化法分离大鼠LSCs后将其按相同浓度分别种植于3种事先准备好的羊膜载体和无载体孔中,分为4组。实验1组：保留上皮的新鲜羊膜组;实验2组：去除上皮的新鲜羊膜组;实验3组：去除上皮的冷冻羊膜组;对照组：无羊膜载体组。4组细胞分别作细胞凋亡检测,p63、PCNA免疫荧光检测,检测阳性细胞计数。结果 培养第3天,3个实验组培养的细胞排列紧密,融合形成单层,其中可见大小不等的团块状集落,细胞大小基本一致,多呈圆球形或卵圆形。对照组培养的细胞排列相对稀疏,基本融合,形成单层,可见散在的、大小不等的桑葚样细胞集落,集落细胞的生长特征及形态特点与实验组相似。实验组的细胞凋亡率均低于对照组,p63阳性率和PCNA阳性率均高于对照组（P〈0.01）,尤以实验1组变化最为明显（P〈0.01）。结论 羊膜载体有利于体外培养大鼠LSCs的扩增,保留上皮的新鲜羊膜能更好地维持体外培养LSCs的特性,是体外角膜缘干细胞培养的理想载体。

关键词：角膜缘 干细胞 羊膜 染色与标记 角膜 

单位：贵州医科大学组织学与胚胎学教研室; 贵阳550004