摘要：目的 目的用包含切除修复交叉互补（ERCC1）基因特异RNA序列的慢病毒,将其转染入宣威肺腺癌细胞XWCL05中,沉默ERCC1基因表达,初步探讨其基因沉默效果及对顺铂敏感性的影响,为顺铂耐药逆转提供思路和依据。方法经293T细胞包装后构建ERCC1基因RNAi的慢病毒载体及阴性对照,分别使用XWCL05空白组（空白对照）、XWCL05-neg组（转染空载体）、XWCL05-RNAi组（转染ERCC1-RNAi慢病毒）。Western blot法检测转染前后XWCL05细胞中ERCC1蛋白的表达。12.5μg/mL顺铂作用48h后,用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测顺铂对各组XWCL05细胞增殖抑制率的影响;流式细胞术检测各组中XWCL05细胞的凋亡率。结果 （1）Western blot结果显示,XWCL05-RNAi组中ERCC1蛋白表达水平显著低于XWCL05-neg组（P〈0.05）,而XWCL05-neg和XWCL05空白组差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）MTT法检测显示相同浓度顺铂作用下,XWCL05-RNAi组的增殖抑制率显著高于XWCL05-neg组和XWCL05空白组（P〈0.05）,而XWCL05-neg组。（3）流式细胞术检测结果显示,XWCL05-RNAi组凋亡率显著高于XWCL05-neg组和XWCL05空白组（P〈0.05）。而顺铂作用后,各组凋亡率较前均显著升高（P〈0.05）,且XWCL05-RNAi组凋亡率显著高于其余两组。结论 ERCC1基因RNAi的慢病毒能够有效地沉默宣威肺腺癌细胞XWCL05中ERCC1基因的表达,并增强XWCL05对顺铂的敏感性。

关键词：遗传载体 rna干扰 ercc1 肺腺癌细胞 

单位：昆明医科大学第三附属医院胸外科; 650118