摘要：[摘要]目的探讨P13K／Akt信号通路是否调控脂多糖诱导的人内皮细胞VCAM—1表达及机制。方法脂多糖（LPS）10μg／mL刺激人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）0、6、12、24h，蛋白免疫印迹法（westerrtblot）检测VCAM_1蛋白表达，刺激0、4、8、12h行RT-PCR检测VCAM-1mRNA；LPS（10vg／mL，后同）刺激HUVEC0、30、60、120min后，Westernblot检测P13K（磷脂酰肌醇-3激酶）、磷酸化P13K（p-P13K）、Akt、磷酸化Akt（p-Akt）表达；P13K抑制剂LY294002（10、50μmol／L）、Akt抑制剂A6730（2、10gmol／L）预处理细胞1h后LPS刺激12h，Westernblot检测VCAM-1蛋白表达，刺激8h行RT-PCR检测VCAM-1mRNA；加或不加抑制剂，LPS刺激8h加入放线菌素D抑制转录，于0、1、2、3、4h收细胞行RT—PCR检测VCAM-1mRNA，计算mRNA半衰期。结果LPS刺激HUVEC（6、12、24h）后VCAM_1蛋白表达增加（P〈0．05），12h达峰值，VcAM-1mRNA在刺激后也增加（P〈0．05），8h达峰值；LPS刺激HUVEC后p-P13K、p-Akt增加，p-P13K在刺激30min达峰值（P〈0．05），以后逐渐下降，120min与0h接近（P〉0．05），p-Akt在刺激30min明显增加，60min达峰值，120min仍高于0h（P〈0．05）；LY294002下调了p-Akt表达（P〈0．05），同时降低VcAM-1蛋白、mRNA合成（P〈0．05）；Akt抑制剂也抑制VCAM-1蛋白、rnRNA（P〈0．05）；P13K、Akt抑制剂均不影响VCAM-1mRNA稳定性（P〉0．05）。结论PIgK／Akt信号途径在转录水平调控VCAM_1表达。

关键词：脂多糖 人脐静脉血管内皮细胞 血管细胞黏附分子 

单位：徐州医学院附属连云港医院急诊内科; 江苏连云港222000; 徐州医学院附属连云港医院呼吸内科; 江苏连云港222000