摘要:目的通过检测新生大鼠心室肌细胞在给予药物决奈达隆前后超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN通道)mRNA和蛋白水平的变化,探讨决奈达隆对HCN通道表达的影响。方法分离新生SD大鼠心室肌,Ⅱ型胶原酶消化,通过差速贴壁分离法收集获得单一的心室肌细胞。并根据浓度(0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、20.0μmol/L的决奈达隆对细胞进行处理48h)和时间(浓度为10μmol/L的决奈达隆对细胞进行1、6、12、24、48h的处理)梯度分组。采用实时荧光定量PCR法和Western blot检测HCN2、HCN4通道mRNA水平和蛋白水平。结果浓度梯度组和时间梯度组的HCN2 mRNA和HCN4 mRNA表达水平均低于对照组(P〈0.05);与对照组比较,10μmol/L决奈达隆处理后12h组的蛋白水平明显下调(P〈0.01)。结论决奈达隆可抑制HCN2、HCN4通道mRNA和蛋白的表达,且作用呈浓度依赖性,在给药后12h达到最大作用。
关键词:决奈达隆 超极化激活环核苷酸门控阳离子通道 rna 信使 蛋白质类
单位:西南医科大学医学电生理学省部教育部重点实验室/四川省心血管疾病防治协同创新中心; 四川泸州646000
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