摘要：目的 以PRDM1基因启动子为靶点构建双荧光素酶报告基因载体,建立体外药物筛选细胞模型,并对中草药小分子化合物进行筛选。方法 将人PRDM1基因启动子序列（267、1 257bp）克隆入荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic中,构建重组质粒pGL3-PRDM1并与内参质粒pRL-TK瞬时共转染工具细胞,通过检测荧光素酶报告基因表达水平的变化反映PRDM1基因启动子的启动转录活性,并对共转染质粒比例、工具细胞选择等条件进行探索和优化,相关药物处理进行验证。结果 成功构建了荧光素酶报告载体pGL3-PRDM1。用0.5、1、2、4μmol/L的5-Aza-CdR处理重组的U266细胞筛选模型,与0μmol/L 5-Aza-CdR相比,增加5-Aza-CdR的刺激,荧光强度及PRDM1基因启动子的活性呈剂量依赖性增强。与0μmol/L相比,青蒿琥酯从5μmol/L浓度开始对PRDM1基因启动子活性呈明显降低（P〈0.05）,在20μmol/L浓度时降到最低;白芍总苷呈现小剂量促进PRDM1启动子活性,高剂量抑制PRDM1基因启动子活性。青蒿琥酯对细胞生长增殖影响较小,白芍总苷对细胞生长增殖的影响较复杂。结论 成功建立了以PRDM1基因启动子为靶点的药物筛选模型,并筛选出青蒿琥酯能抑制PRDM1基因启动子活性。

关键词：prdm1基因 双荧光素酶报告基因 中草药 药物筛选 

单位：郑州大学第一附属医院检验科; 郑州450003; 河南中医学院第一附属医院检验科; 郑州450002