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连接酶-ELISA检测K-ras基因突变方法研究

肖娜; 唐一通; 崔海忠; 李智山; 邹玖明 重庆医学 2018年第02期

摘要:目的 研究一种简便、灵敏的K-ras基因突变检测方法,使其适合于进行常规突变检测。方法 设计对应检测位点寡核苷酸探针,经探针的连接、扩增、标记及ELISA反应,通过ELISA反应检测值确定突变位点基因型。以K-ras基因12位密码子的G12S、G12R、G12C、G12D、G12A、G12V6个点突变为检测对象,对72例肺癌血浆循环DNA标本进行检测,并与直接测序结果进行比较。结果 利用建立方法共检出3例标本分别存在G12S、G12R、G12A突变。而通过直接测序未能从标本中检出K-ras突变,表明直接测序方法灵敏度较低,不适合于对循环DNA等不均一标本进行突变检测。结论 建立了一种简便、灵敏的K-ras基因突变检测方法,能够对不均一标本进行常规突变检测。

关键词:基因ras突变循环dnadna连接酶类

单位:湖北文理学院医学院; 襄阳441053; 湖北文理学院医学院枣阳临床学院; 枣阳441200; 湖北文理学院附属医院; 襄阳441021

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