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miR-107靶向细胞周期蛋白E1对人非小细胞肺癌A549细胞功能的影响研究

刘荷英; 王辉; 季洪健; 姚秋菊 重庆医学 2018年第08期

摘要:目的 探讨miR-107对非小细胞肺癌A549细胞功能的影响及可能的靶基因。方法 实验分为脂质体+miR-107模拟物过表达组(OV-miR-107组)、脂质体+miR-107抑制模拟物下调组(KD-miR-107组)和脂质体+阴性对照模拟物组(NC组),siRNA的细胞转染分别为siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3。MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞实验检测细胞周期,双荧光素酶报告基因实验检测miR-107下游靶基因,实时定量逆转录PCR和Western blot分别检测下游靶基因mRNA和蛋白表达。结果miR-107呈时间和剂量依赖性地抑制A549细胞的增殖(P〈0.05);miR-107阻滞更多A549细胞停留在G0G1期,而S期和G2M期占比下降(P〈0.05);miR-107结合于细胞周期蛋白E1(CCNE1)的3′-UTR区域246~253bp位点,并降低CCNE1mRNA和蛋白表达(P〈0.05);A549细胞中下调CCNE1后,siRNA-2抑制细胞增殖(P〈0.05)并阻滞细胞停留在G0G1期(P〈0.05)。结论 miR-107靶向调节CCNE1抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖和调控细胞周期。

关键词:细胞周期蛋白e1细胞周期非小细胞肺

单位:上海解放军第85医院呼吸内科; 200052

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