摘要:目的探讨氯苯甲酰氨-1,1′双十八烷基-3,3′,3′,3′-四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐(CM-Dil)体外标记骨髓间充质干细胞的可行性。方法分离培养并鉴定大鼠骨髓间充质干细胞,分别用1、2、4μg/mL的CM-Dil标记间充质干细胞,观察标记后15 min、24 h、48 h、72 h、传5代、传8代的标记率;用流式细胞仪检测标记前后细胞周期的变化;用细胞计数Kit-8(CCK8)法检测细胞增殖能力。结果采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞CD44、CD29表达阳性,CD34、CD45表达阴性。1、2、4μg/mL CM-Dil标记15 min后标记率分别为(31.60±1.25)%、(88.73±1.79)%、(96.89±1.31)%,差异有统计学意义(F=1 757.21,P=0.000);4组间生长曲线趋势大致相同,且4组间G 1期、S期及G 2/M期细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05)。结论4μg/mL CM-Dil细胞标记率高,无细胞毒性,可作为一种高效而稳定的体外标记间充质干细胞的方法。
关键词:骨髓间充质干细胞 细胞标记示踪
单位:南方医科大学珠江医院妇产科; 广州510282
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