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根癌农杆菌介导获得稗草Ecppc转基因小麦的研究

张彬; 丁在松; 张桂芳; 石云鹭; 王金明; 方立锋; 郭志江; 赵明 作物学报 2007年第03期

摘要:采用携带pUbi—Ecppc质粒的3个根癌农杆菌菌株(LBA4404、EHA105和C58c1),对经过预培养10~12d的春小麦品种扬麦158、Bobwhite和扬麦12的幼胚愈伤组织进行了遗传转化,对筛选中的抗生素浓度、菌液浓度、共培养温度和时间、受体基因型、菌株-质粒组合等影响转化的重要因素进行了研究。首次将单子叶野生C4植物稗草的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(Ecppc)导人不同基因型小麦受体,并得到具有潮霉素(Hyg)抗性的转化植株。从816块共培养愈伤组织中转化得到34株抗性植株,其中14株PCR检测为阳性。扬麦158的转化效率达3.03%。Southern和RT-PCR分析表明,外源基因已整合到小麦基因组并得到正确的转录。生理学检测显示,转基因小麦植株的光合速率和PEPC活性都有所提高。说明Ubiqintin基因启动子控制的稗草PEPC cDNA基因在小麦中可以正确表达和起到一定的生理作用。这些工作为进一步探讨PEPC对小麦光合作用及其他生理过程的影响奠定了基础。

关键词:小麦农杆菌介导法转基因植株

单位:中国农业科学院作物科学研究所; 国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程; 北京100081; 山西农业大学; 山西太谷030801; 北京师范大学生命科学学院; 北京100085; 中国农业大学农学与生物技术学院; 北京100094

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