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转根癌农杆菌介导的AtNHX1基因马铃薯的获得

张俊莲; 王丽; 王蒂; 张金文; 陈正华 作物学报 2007年第07期

摘要:构建重组表达质粒pBI12135-GZ+AtNHX1(带有CaMV35S启动子),通过农杆菌将其携带的液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(AtNHX)转化马铃薯栽培品种“甘农薯2号”试管薯薄片和“克新2号”茎段。经根癌农杆菌侵染和共培养后,用50mgL^-1卡那霉素+300mgL^-1头孢霉素筛选抗性芽,试管薯薄片获得30株抗性植株,抗性植株再生率为37%;茎段未获得抗性植株。抗性植株的总DNA用AtNHX1基因的特异性引物进行PCR检测,结果27株为阳性,占90%。Southern杂交结果证实,外源基因多以双拷贝整合到马铃薯的基因组中。Northern杂交结果表明,转基因植株可以进行AtNHX1基因mRNA的正常转录,但植株间存在着转录量的差异。该研究为耐盐马铃薯的培育奠定了良好的基础。

关键词:马铃薯根癌农杆菌转基因植株atnhx1基因

单位:甘肃农业大学甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室; 甘肃兰州730070; 甘肃农业大学农学院; 甘肃兰州730070; 甘肃农业大学生命科学技术学院; 甘肃兰州730070; 甘肃亚盛集团博士后科研工作站北京分站; 北京100101

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