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棉花ADP-ribosylationfactor基因(GhARF1)的克隆与表达分析

侯磊; 李家宝; 罗小英; 王文锋; 肖月华; 罗明; 裴炎 作物学报 2007年第08期

摘要:ADP-fibosylation factor(ARt)是GTP结合蛋白,属于小G蛋白超家族中的ARF亚家族成员,在高尔基体小囊泡形成以及细胞信号传导中起重要作用。棉花纤维的发育需要有高尔基体参与,但ARF基因在棉花纤维发育中的功能尚不清楚。本文利用GHA27作探针,筛选棉花花药的cDNA文库,得到两个序列相同的阳性克隆。核苷酸序列分析表明该基因编码一个有181个氨基酸残基,分子量约20.7kD的蛋白,与动物、酵母及其他植物的ARF基因有很高的相似性,命名为GbARF1。采用PCR技术获得该基因序列,该基因含有5个外显子和4个内含子。进化树分析表明该基因更接近人类的classⅠ类ARF基因,在编码的氨基酸序列中具有保守的GTP结合区域,即P(GLDAAGKT)、G(NKQD)以及G'(DVGGQ)。Northern杂交结果显示GbARFI基因在棉花的纤维、花冠和根中表达量较高,特别是在纤维中的表达量最高,在茎、花蕾中也有表达,而在真叶、子叶和胚珠中的表达较微弱。Southern杂交分析表明,ARF基因在二倍体草棉和四倍体陆地棉基因组中均以多拷贝存在。

关键词:adp核糖基化因子结构特征g蛋白棉花

单位:农业部生物技术与品质改良重点开放实验室; 西南大学生物技术中心; 重庆400716

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