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甘蓝型油菜Cu/ZnSOD和FeSOD基因的克隆及菌核病菌诱导表达

杨鸯鸯; 李云; 丁勇; 徐春雷; 张成桂; 刘英; 甘莉 作物学报 2009年第01期

摘要:依据拟南芥、芥菜型油菜和白菜已知超氧化物歧化酶(SOD)保守序列设计引物,用同源序列法和RT-RACE技术克隆甘蓝型油菜Cu/ZnSOD和FeSOD基因,经序列分析和基因片段拼接,得到Cu/ZnSOD和FeSOD基因的全长cDNA,分别为756bp(GenBank登录号AY970822)和1037bp(GenBank登录号EF634058)。以cDNA序列设计引物,获得1322bp的Cu/ZnSOD基因组DNA(GenBank登录号DQ431853)和1659bp的FeSOD基因组DNA(GenBank登录号EF634057)。生物信息学分析表明,Cu/ZnSOD基因ORF框长459bp,编码152个氨基酸残基的蛋白质,在基因组序列结构上具有7个外显子和6个内含子。而FeSOD基因ORF框长792bp,编码263个氨基酸残基的蛋白质,在基因组序列结构上具有8个外显子和7个内含子。二者外显子和内含子交接处完全符合GT/AG规则。利用获得的Cu/ZnSOD的cDN段作探针,对菌核病菌诱导甘蓝型油菜叶片的mRNA进行Northern blot分析,结果显示在同一品种(系)中菌核病菌诱导后Cu/ZnSODmRNA表达量比诱导前升高,抗(耐)型油菜Cu/ZnSODmRNA表达量明显高于感病型。油菜叶片SOD酶活性分析结果也获得了完全一致的结果。以上结果表明,甘蓝型油菜SOD基因与菌核病抗性相关。

关键词:甘蓝型油菜菌核病菌基因表达分析

单位:华中农业大学植物科学技术学院; 湖北武汉430070

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