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花生中DREB类转录因子PNDREB1的克隆及鉴定

张梅; 刘炜; 毕玉平; 王自章 作物学报 2009年第11期

摘要:脱水响应元件结合因子(DREB)是一类对多个抗逆相关基因表达起调控作用的植物特有的转录因子,在植物抗逆能力综合改良方面具有重要作用。本研究通过筛选花生未成熟种子的cDNA文库,分离到一个DREB类基因——PNDREB1(FM955398)。该基因序列长度为687bp,推测编码蛋白含有229个氨基酸残基,相对分子量为24.7kD,理论等电点为5.97,与其他物种中该类转录因子序列同源性较高。利用酵母单杂交系统,对花生PNDREB1与DRE元件的特异识别和结合能力及其C-末端转录激活活性进行检测,显示,转入含有该基因及阳性对照基因的载体均可使酵母菌株正常生长,且具有显色反应,而转入空载体的酵母菌株不能生长,证明基因PNDREB1中的AP2结构域具有和DRE元件特异性结合的能力;同时,只有转入含有该基因C-末端片段及阳性对照基因的载体可使酵母菌株正常生长,并具有显色反应,而转入空载体的酵母菌株不能生长,说明其C-末端片段具有转录激活活性,该基因为DREB类转录因子。基因表达模式分析显示,PNDREB1为组成型表达,且被低温强烈、迅速诱导表达,并对干旱胁迫也有一定程度的响应,但对高盐和ABA处理没有响应。

关键词:花生dreb类转录因子pndreb1酵母单杂交表达模式

单位:山东省农业科学院高新技术研究中心/山东省作物与畜禽品种改良生物技术重点实验室; 山东济南250100; 农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室; 山东济南250100; 山东师范大学生命科学学院; 山东济南250014; 中国科学院植物研究所; 北京100093

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