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花生白藜芦醇合成酶基因PNRS1的克隆及其在原核中的表达

韩晶晶; 刘炜; 毕玉平 作物学报 2010年第02期

摘要:采用RT—PCR克隆花生白藜芦醇合成酶(resveratrol synthetic enzyme,RS)基因全长,命名为PNRS1,GenBank登录号为FM955393。序列分析表明该基因的开放读码框1170bp,编码389个氨基酸残基。以花生品种鲁花14基因组DNA为模板经PCR扩增,获得该基因的基因组序列长1537bp,包含2个外显子和1个内含子。比较发现,PM2s,与其他已知RS序列的同源性达91%~95%。表达模式分析显示,PNRS1在花生根中特异表达,并可被紫外线UV—B诱导。PNRS1与pET-28a(+)构建原核表达载体,经IPTG诱导后可表达获得相对分子量约为46kD的外源融合蛋白。以上结果证实州Rs,属花生RS基因家族成员,并为进一步分析该基因的功能奠定了基础。

关键词:花生白藜芦醇合成酶表达模式原核表达融合蛋白

单位:山东省农业科学院高新技术研究中心/农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室; 山东济南250100; 山东师范大学生命科学学院; 山东济南250014

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