摘要：根据紫花苜蓿锌指蛋白MsZFN基因（GenBank登录号为EU624138）序列,设计两对含有酶切位点的特异性引物,以紫花苜蓿cDNA为模板,分别合成用于构建干扰载体的正反义片段,将正反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置,构建成含有发夹结构的RNAi载体pART-F-R。利用农杆菌介导方法,将pART-F-R转化到紫花苜蓿中,经过PCR检测,获得了3株转基因植株。经过RT-PCR检测,证明转基因植株中MsZFN基因表达量明显低于未转基因的植株。结果表明,已构建成功具有发夹结构的RNAi载体pART-F-R,它可有效的抑制紫花苜蓿MsZFN基因。

关键词：紫花苜蓿 锌指蛋白 rnai 转基因 

单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所; 北京100193; 重庆大学生物工程学院; 重庆400030; 中国农业大学; 北京100193