摘要：采用PCR、RT-PCR及其他分子生物学方法,以甘蓝基因组DNA、花蕾RNA和叶片RNA为模板,分别对甘蓝KAPP gDNA和KAPP cDNA进行扩增,分别获得3247bp的KAPP gDN段、1699bp的KAPP cDN段、1578bp的花蕾KAPP2 cDN段和1581bp的叶片KAPP2cDN段。对克隆的甘蓝KAPP gDNA和cDNA（结合报道的KAPPcDNA）进行比对表明,甘蓝KAPP基因包含11个内含子,均符合＂GU-AG＂剪接规则,并且克隆得到的KAPP cDNA序列与报道的KAPP cDNA序列有6处单个碱基的差异,但两者的氨基酸序列完全一致。然而花蕾KAPP2 cDNA、叶片KAPP2 cDN段与报道的KAPP cDNA序列相似性分别为85.2%和85.0%。这两个序列分别在590bp和593bp处较早出现一个无义突变引起的终止密码子。Blast分析表明,两基因编码的氨基酸序列与拟南芥KAPP氨基酸序列相似性最高,其次为甘蓝KAPP氨基酸序列。以已报道的8种植物KAPP的CDS及本实验所克隆的两个KAPP2序列构建分子进化树,获得序列与甘蓝KAPP序列聚为一支。结合比较作图及分子进化树,推测KAPP基因在甘蓝基因组上有两个拷贝,而笔者克隆到的KAPP2 cDNA序列是其中一个拷贝,是KAPP进化过程中突变失活的拟基因。

关键词：自交不亲和性 信号转导 kapp基因 甘蓝 

单位：西南大学植物生理生化实验室; 重庆400716; 重庆市油菜工程中心; 重庆400716; 西南大学蔬菜学实验室; 重庆400716