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根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立

黄天带; 李哲; 孙爱花; 周权男; 华玉伟; 黄华孙 作物学报 2010年第10期

摘要:为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系,以花药愈伤组织为受体,研究了农杆菌菌株、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响。结果表明,农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对转化效率具有显著影响,AS不影响转化效率。2.2万个花药愈伤组织经EHA105菌株侵染后,转入未添加AS的培养基,22℃共培养6d,通过50mgL-1卡那霉素抗性筛选、叶片GUS染色、uidA和NptII基因PCR特异扩增、PCR产物测序及NptII基因Southern检测,鉴定出11株转基因植株,并通过嫁接和次生体胚发生,获得来自8个转基因株系的681株转基因植株,移栽成活253株。

关键词:橡胶树根癌农杆菌花药愈伤组织遗传转化次生体胚发生

单位:中国热带农业科学院橡胶研究所/国家橡胶树育种中心/农业部橡胶树生物学重点开放实验室/省部共建国家重点实验室培育基地/海南省热带作物栽培生理学重点实验室; 海南儋州571737

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