摘要：以甜菜品种甜研7号叶片的cDNA为模板,采用RT-PCR和3′/5′RACE技术,获得了编码亚硝酸还原酶基因（NiR）的cDNA全序列2014bp,包含有1830bp的开放阅读框,编码599个氨基酸。所推导的氨基酸序列与菠菜及拟南芥NiR编码的氨基酸序列均具93%的同源性。生物信息学分析表明,甜菜NiR具有完整的NiR蛋白结构,含血红素蛋白β-化合物区域和4Fe-4S区域,并利用分析软件预测其三维结构。实时荧光定量结果显示,在以0、10、20、30、40、50、80和160mmol L-1NO3–-N处理72h的试验中,50mmol L-1处理可使甜菜NiR的表达量达到最大;以0、2、4、8、16、32、64和128mmol L-1NH4＋-N处理48h的试验表明,8mmol L-1和64mmol L-1处理条件下甜菜NiR表达量相对较高。硝态氮和铵态氮不同配比处理48h的试验中,NO3–-N和NH4＋-N比例为80∶20可使甜菜NiR的表达量达到最大;在氮素诱导的基础上,蛋白抑制剂放线菌酮处理9h,随着处理浓度的增大,NiR的表达量逐渐下降;不同浓度NO2–处理的试验中,40mmol L–1处理下NiR的表达量最大。

关键词：甜菜 亚硝酸还原酶 cdna 克隆 基因表达 

单位：东北农业大学农学院; 黑龙江哈尔滨150030