摘要：小麦黄矮病是由蚜虫介导的大麦黄矮病毒（Barley yellow dwarfvirus,BYDV）侵染引起的小麦重要病害之一。利用cDNA-AFLP分析,筛选出在抗黄矮病小麦易位系YW642中特异表达的长度为292bp的cDN段,以此片段为启始序列,利用RACE和RT-PCR技术克隆出该基因的全长cDNA序列,推导该基因编码1个NBS-LRR蛋白,将其命名为TNBL1。本研究利用大麦条纹花叶病毒（BSMV）诱导的基因沉默（virus-inducing gene silencing,VIGS）技术,快速分析TNBL1是否参与小麦抗黄矮病反应。通过PCR添加酶切位点、定向酶切与连接,将TNBL1特异的292bp片段反向整合到BSMV-γ链的多克隆位点上,获得重组载体BSMV-γ：TNBL1as,体外转录BSMV-VIGS载体的3个组分（BSMV-TNBL1as、BSMV-α和BSMV-β）,等量混合、摩擦接种到抗黄矮病的小麦易位系YW642幼苗叶片上,使YW642中TNBL1基因沉默,然后接种BYDV病原进行黄矮病抗性鉴定。结果表明,TNBL1基因沉默后的YW642对BYDV敏感、显现感病症状,其体内BYDV含量较未发生基因沉默的YW642中的明显增加,证明TNBL1基因是正向调控小麦抗BYDV反应的1个重要基因。

关键词：小麦 中间偃麦草 黄矮病 病毒诱导的基因沉默 

单位：中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室; 北京100081; 河北师范大学生命科学院; 河北石家庄050016; 中国农业科学院植物保护研究所; 北京100093