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油菜Nsa CMS候选恢复基因的来源及表达

张洪; 付丽; 李云昌; 刘佳; 梅德圣; 彭鹏飞; 陈玉峰; 胡琼 作物学报 2012年第07期

摘要:根据同源序列法克隆的NsaCMS候选恢复基因PPR6J8的序列,采用PCR方法在NsaCMS不育系、恢复系、原始体细胞杂交亲本以及其他甘蓝型油菜品种中共克隆出22个同源序列。序列分析表明,野芥亲本野油18、甘蓝型油菜亲本中双4号各含有2个同源序列,而NsaCMS4个恢复系则分别含有3、1、1、1个同源序列。恢复系中候选恢复基因的序列与野芥亲本野油18的同源序列的一致性在93%以上,其中恢1、恢3和恢4中至少有一个同源序列与野油18的第1个同源序列完全相同,恢2中的同源序列与野油18的第2个同源序列完全相同;但与甘蓝型油菜的同源序列一致性均低于80%,说明候选恢复基因来源于新疆野芥,而不是甘蓝型油菜。除了原来的P尸R618外,获得了3个来源于恢复系的新候选恢复基因。候选恢复基因在序列上与萝卜和矮牵牛的恢复基因一致性较高。半定量RT-PCR分析表明,候选恢复基因在恢复系多个组织中都有表达,但在根、茎中表达量特别少。其表达量随着营养器官到生殖器官的发育逐渐升高,最高的是在1.5—2.5mm的花蕾中,即雄性败育关键时期。但不育系中的同源基因在茎中的表达量则相对高于其他组织。

关键词:nsacms恢复基因同源序列表达

单位:中国农业科学院油料作物研究所/国家油料作物改良中心/农业部油料作物生物学与遗传育种重点开放实验室; 湖北武汉430062

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