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转基因玉米MIR162转化事件特异性检测方法及其标准化

张广远; 孙红炜; 李凡; 杨淑珂; 路兴波; 赵蕾 作物学报 2013年第07期

摘要:转基因玉米MIR162是美国先正达公司开发的新型抗鳞翅目昆虫的转基因玉米品种。本研究目的在于建立该品系转化事件特异性定性、定量检测方法并形成定性检测国家标准。定性PCR体系经实验室内部比对及实验室间循环验证结果表明,该体系特异性强,灵敏度较高(0.1%),具有良好的重复性和再现性。TaqMan探针实时荧光PCR检测结果表明,所设计的探针特异性强,检测低限(LOD)在0.01%以下;定量标准曲线序均为0.999,扩增效率为98.622%和99.602%,SD范围为0.014~0.209,RSD的范围为0.049%~0.879%,稳定性好;对转基因含量为1.0%、0.5%、0.1%的样品定量结果相对偏差在8.0%以内,结果较为准确。本研究建立的方法完全可用于含转基因玉米MIR162成分样品的检测。

关键词:转化体特异性mir162定性pcrtaqman探针实时荧光pcr标准化

单位:山东省农业科学院植物保护研究所; 山东省植物病毒学重点实验室; 山东济南250100; 山东师范大学生命科学学院; 山东济南250014

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