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白菜型冬油菜抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因的克隆、表达及其活性分析

曾秀存; 孙万仓; 方彦; 刘自刚; 董云; 孙佳; 武军艳; 张鹏飞; 史鹏辉; 孔德晶; 张腾国; 何丽; 赵彩霞 作物学报 2013年第08期

摘要:抗坏血酸过氧化物酶(APX)是一种在逆境条件下清除细胞内氧自由基、增强植物抗逆性的关键酶。本研究根据已发表植物抗坏血酸过氧化物酶基因APX的同源保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号的DNA,获得APX基因开放阅读框,长度为753 bp,编码250个氨基酸残基,推导的氨基酸序列具有APX蛋白的典型特征。生物信息学分析显示,与已报道的大白菜的APX氨基酸序列同源性达99%,该酶蛋白具有高度的进化保守性,其保守序列属于植物的POD超家族,APX相对分子质量和理论等电点依次为27.7 kD和5.58;APX基因无信号肽,是一个亲水性蛋白,可推测其定位于细胞质中;二级结构预测表明陇油7号的APX是由不规则卷曲和α-螺旋组成的稳定蛋白。实时荧光定量PCR和酶活性分析显示,该基因表达和酶活性受低温胁迫诱导,表明该基因在白菜型冬油菜陇油7号适应低温胁迫过程中发挥重要作用。

关键词:白菜型油菜低温apx基因克隆表达分析apx活性

单位:甘肃农业大学农学院; 甘肃兰州730070; 河西学院农业与生物技术学院; 甘肃张掖734000; 甘肃省农业科学院作物研究所; 甘肃兰州730070; Department; of; Plant; Sciences; University; of; Saskatchewan; Saskatoon; Saskatchewan; S7N5A8; Canada.; 西北师范大学生命科学学院; 甘肃兰州730070

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