摘要：以陆地棉CLA1基因为标记基因,利用烟草脆裂病毒（tobacco rattle virus, TRV）载体建立基于病毒介导的棉花基因沉默体系（virus-induced gene silencing, VIGS）。病毒RNA2的RT-PCR分析证明,棉花子叶接种TRV病毒后,该病毒可高效扩散到受体的根、茎、叶等器官。利用TRV-VIGS体系同时诱导34份不同来源棉花材料CLA1基因沉默,尽管不同材料间的抑制程度有差异,但均可有效抑制 CLA1基因的表达,说明该体系在棉花研究中的广谱利用性。GhMAPKKK 基因受黄萎病菌诱导表达,接种后96 h 表达量达到高峰。利用 TRV-VIGS 体系,成功抑制了棉花GhMAPKKK 基因的表达,与对照株相比,抑制后的棉花植株接种黄萎病菌后更易感病,说明 GhMAPKKK 参与了棉花对黄萎病菌的抗性反应。具有广谱性、灵敏性和高通量等特点的棉花 TRV-VIGS 体系建立将加速棉花功能基因组研究进程。

关键词：棉花 ghclal ghmapkkk 黄萎病 

单位：南京农业大学生命科学学院; 江苏南京210095; 南京农业大学农学院; 作物遗传与种质创新国家重点实验室; 江苏南京210095