摘要：本试验利用体外酶学方法,结合薄层层析（TLC）、高效液相色谱（HPLC）和液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析,首次从茶树中检测到活性较高的酯型儿茶素水解酶（Galloylated Catechins Hydrolase,GCH）的存在。在酯型儿茶素水解酶催化下,酯型儿茶素发生水解反应,生成没食子酸（GA）和非酯型儿茶素。试验确立了酯型儿茶素水解酶的最适检测体系,在2.5 mL反应体系中包含0.2 mmol/L酯型儿茶素、2.4 mmol/L抗坏血酸、粗酶提取液若干（含0.1 mg酶蛋白）和0.1 mol/L磷酸缓冲液（pH6.5）,在30℃下,反应30 min。此外,试验利用硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤层析对该酶进行了初步纯化。

关键词：茶树 酯型儿茶素水解酶 鉴定 检测体系 

单位：安徽农业大学生命科学学院 安徽合肥230036 安徽农业大学教育部茶叶生物化学与生物技术重点实验室 安徽合肥230036