摘要:以愈创木酚、α-萘酚、没食子酸、L-酪氨酸和单宁酸等5种酚类物质为底物,采用鉴别培养基筛选法从14株茶树内生真菌中初筛获得4株产多酚氧化酶的真菌。根据变色圈的大小、颜色深浅和摇瓶发酵的结果复筛获得产多酚氧化酶能力较强的菌株CSN-13。对菌株CSN-13产酶营养条件进行初步分析,结果表明,在供试的6种碳源物质中,以麸皮对菌株CSN-13产多酚氧化酶的促进作用最为明显;供试的5种氮源物质中,以硝酸铵的促进作用最为明显;在发酵培养基中添加茶水,对产酶有明显的促进作用。采用正交设计对CSN-13产酶发酵培养基进行初步优化,优化后的培养基配方为:麸皮(40 g·L-1)、硝酸铵(15 g·L-1)、茶水(4 g·L-1)、KH2PO4(2 g·L-1)、Mg SO4·7H2O(0.5 g·L-1)、无水Ca Cl2(0.075 g·L-1)、Cu SO4·5H2O(0.01 g·L-1)。采用优化后的培养基,菌株CSN-13在28℃下培养5 d,酶活力达到241 U·m L-1·min-1,比优化前提高8.5倍。茶树内生真菌菌株CSN-13及其发酵产酶培养基的研究为多酚氧化酶的进一步开发打下了基础。
关键词:茶树 内生真菌 多酚氧化酶 菌株筛选 培养基优化
单位:福建师范大学生命科学学院 福建福州350108 工业微生物教育部工程研究中心福建师范大学 福建福州350108
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