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茶树磷转运蛋白基因CsPT4的克隆、亚细胞定位及表达分析

辛华洪; 王伟东; 王明乐; 马青平; 甘玉迪; 黎星辉 茶叶科学 2017年第05期

摘要:茶园中磷肥的利用效率取决于茶树体内与磷元素吸收、转运及生理利用等相关蛋白的协同调控,而磷转运蛋白(Phosphatetransporterproteins,Phts)在此过程中起着关键的调控作用。本研究以茶树品种龙井长叶(Camelliasinensiscv.Longjing-changye)为试验材料,采用同源克隆的方法首次克隆获得茶树磷转运蛋白编码基因CsPht1:4(CsPT4)的全长cDNA。该基因全长1642bp,开放阅读框(ORF)1620bp(GenBank登录号:KY132100),编码539个氨基酸。生物信息学分析显示,CsPT4基因编码蛋白分子量为59.12kD,理论等电点(pI)为8.51;具有典型的Pht1家族特性:“6-亲水-6”跨膜结构。亚细胞定位结果显示,该蛋白分布于质膜上,与Softberry软件预测结果一致。荧光定量PCR表明:CsPT4在正常生长的茶树根、茎、嫩叶、老叶中均有表达,在老叶中的表达量较高,在根部表达量最低。低磷处理,根和叶中CsPT4上调表达水平均先上升后下降;根部CsPT4表达量48h内各个时间点均高于叶部。缺磷处理,根和叶中CsPT4上调表达水平均升高;根部和叶部分别在72h和48h达最大值。本研究为茶树响应低磷的分子机制提供了参考。

关键词:茶树磷转运蛋白基因克隆亚细胞定位表达分析

单位:南京农业大学茶叶科学研究所; 江苏南京210095

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