摘要:在利用扩增片断长度多态性(AFLP)技术研究燕麦Avuena sativa遗传多样性过程中,从引物筛选、酶切连接、扩增条件、检测方法等几个方面进行优化,建立燕麦AFLP最适反应体系为:800ng/μL DNA用10 U EcoR Ⅰ和4 U Mse Ⅰ在37℃7h,65℃4h温浴双酶切;16℃下连接过夜;预扩增取连接产物μL.10μmol/L预扩引物各0.6μL,10×buffer 2μL,dNTPS2μL,ddH2O补平至20μL;取5μL稀释20倍后的预扩增产物,50ng/μL EcoR Ⅰ、Mse Ⅰ选扩引物各0.8μL.总体系20μL进行选择性扩增。在此优化体系下.可以得到重复性好、稳定且多态性高的燕麦AFLP条带。
关键词:燕麦 aflp反应体系 优化
单位:甘肃农业大学草业学院 甘肃兰州730070
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