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腺病毒介导Cx43基因修饰对急性白血病骨髓基质细胞GJIC功能的影响

司英健; 张曦; 刘耀; 童燕敏; 陈幸华; 高力; 高蕾; 彭贤贵; 光丽霞; 王庆余 第三军医大学学报 2007年第12期

摘要:目的观察急性白血病骨髓基质细胞(acute leukemia bone marrow stromal cells,ALBMSCs)经腺病毒介导的间隙连接蛋白43(Cx43)基因修饰后Cx43基因表达的变化以及对细胞间隙连接通讯(GJIC)功能的影响。方法用重组腺病毒Ad—Cx43-GFP转染ALBMSCs,荧光显微镜观察报告基因GFP的表达并计算转染效率,RT-PCR法、Western blot法和免疫细胞化学法检测ABMSCs转染前后Cx43基因及蛋白表达情况,通过染料传输实验观察细胞间隙连接通讯功能的变化。结果荧光显微镜下观察可见ALBMSCs在转染Ad—Cx43-GFP后24h即有绿色荧光表达,计数绿色荧光细胞的百分率得出转染效率为(82.7±2.16)%;RT-PCR法、Western blot法和免疫细胞化学法检测显示转染Ad-Cx43-GFP后ALBM-SCs Cx43基因及蛋白表达较转染前增强(P〈0.01);转染Ad—Cxd3-GFP后ALBMSCs GJIC功能较转染前增强(P〈0.01)。结论腺病毒介导Cx43基因修饰ALBMSCs后可E调其Cx43基因的表汰并增强GJIC功能.

关键词:cx43gjic重组腺病毒急性白血病骨髓基质细胞gfp

单位:第三军医大学新桥医院血液内科; 重庆400037; 西南医院血液内科; 重庆400038; 第三军医大学新桥医院实验技术中心; 重庆400037

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