目的建立小鼠严重颅脑创伤模型探讨粒细胞集落刺激因子（granulocyte colony-stimulating factor，G-CSF）动员循环间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）的可行性，并观察G-CSF动员的修复效应。方法以G-CSF作为动员剂，培养骨髓和外周血来源的MSCs，计数动员前后的CFU-F。制作小鼠严重颅脑创伤模型，致伤后采用G-CSF对MSCs进行动员，在...
妇女绝经后由于卵巢功能明显减退，雌激素水平降低，导致子宫萎缩，宫颈变硬，宫颈口变窄甚至封闭。随着绝经时间延长，这种变化更加明显，而宫内节育器（intrauterine contracepfivedevice，IUD）的大小不变。这样既导致IUD取出困难，也使绝经后妇女对取节育器产生顾虑和恐惧。我院对绝经后妇女在取节育器前1h给予口服米索前列醇，取得满意效果...
目的观察腺苷A1受体的活化能否影响缺氧心肌细胞线粒体通透性转换孔的开放及蛋白激酶C（proteinkinase C，PKC）在其中的作用。方法将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞分为5组：对照（常氧）组（A组），缺氧组（B组），缺氧＋腺苷A1受体激动剂组（C组），缺氧＋腺苷A1受体阻断剂组（D组），缺氧＋腺苷A1受体激动剂＋PKC阻断剂组（E组）。缺氧6h后以...
目的构建人整合素（integfin）β1基因的小干扰RNA（siRNA）表达载体（pGenesil—integrinβ1），建立integrinβ1剔降血管内皮细胞株，观察integrin β1对EA．hy926细胞株增殖的影响。方法合成integrin β1 siRNA模板，经退火后插入到pGenesil—1荧光载体。阳性重组质粒经DoTAP转染至EA．hy926细胞中。蛋白印迹观察pGenesil-integfinβ1表达载体对目...
目的了解缺氧后ECV-304细胞钙／钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶（calcium／calmodulin—dependent serine protein kinase，CASK）蛋白表达及细胞内分布的变化。方法将培养的ECV-304细胞置于缺氧（5％O2）条件培养1、3、6、12h，用Western blot方法检测CASK表达的变化，用免疫组化技术观察CASK在细胞内分布情况。结果ECV-304细胞的CASK表达随缺氧...
目的构建含有1-Caldesmon基因的重组腺病毒表达载体。方法以含有1-Caldesmon全长编码序列的pCGN—CaD为模板，PCR扩增1-Caldesmon，T—A克隆，酶切亚克隆到穿梭质粒pAdtrack-CMV上，在BJ5183菌内和pAdeasy同源重组，筛选阳性克隆，酶切鉴定，线性化后脂质体法转染HEK293细胞进行包装、扩增，得到含有1-Caldesmon基因的重组腺病毒，根据报告基因G...
目的建立测定去甲二氢愈创木酸（NDGA）含量和检查有关物质的HPLC方法。方法采用Zorbax SB—C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），检测波长为282nm。含量测定以三氟醋酸-水-乙腈（0．05：45：55，pH3．5）为流动相，有关物质检查采用梯度洗脱，以三氟醋酸-水（0．05：100）为流动相A，三氟醋酸-乙腈（0．05：100）为流动相B，洗脱梯度：0～15min，...
收集本科1997—2006年共379例胸外伤患者。男性280例，女性99例，年龄8～70岁，平均46岁，车祸伤248例，高空坠落伤26例，挤压伤59例，牛角撬伤2例，刀刺伤36例，爆震伤8例。肋骨骨折260例（其中：单侧肋骨骨折162例，双侧肋骨骨折65例，双侧多根多处肋骨骨折33例）。合并食管裂伤5例，肺挫伤215例，血气胸183例，连枷胸20例，膈肌破裂12例。合...
目的用荧光胺标记来示踪氨基葡甘露聚糖（aminoglucomannan，AGM）的跨细胞膜转运，以此证实氨基葡甘露聚糖跨（细胞）膜能力与转运机制。方法用荧光胺标记氨基葡甘露聚糖，将标记所得的荧光衍生物与外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMC）和HepG2细胞在CO2培养箱中孵育，然后用荧光显微镜（紫光作激发光）观察。结果PBM...
目的研究经结构修饰后的异黄酮类化合物F11是否具较好的体外、体内抗癌活性。方法采用MTT法，以5，7，4’-三羟基异黄酮（genistein，GEN）作为对照，研究化合物F11对Hela细胞的抗增殖作用；采用荷瘤裸鼠模型，以GEN和环磷酰胺作为对照，研究化合物F11在体抗癌效应。结果MTT实验结果显示，在相同的作用浓度下，F11处理组Hela细胞形态异常改变，...
目的观察糖基化牛血清白蛋白（advanced glycated bovine serum albumin，AGE—BSA）对人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）小管样结构（tubule like structure，TLS）形成的影响并探讨其可能机制。方法实验设实验组、实验对照组和空白对照组。实验组设25、50、100μg／ml 3个AGE—BSA浓度；同时设置相同浓度...
目的探讨PBS缓冲液pH值对LSAW-bisPNA基因传感器检测系统的影响。方法LSAW-bisPNA基因传感器表面固定终浓度为1．0μmol／L的bis-PNA探针，然后分别在pH5．8～8．0的PBS缓冲液中和相应的靶序列杂交，记录相位变化及反应所需时间。结果在不同pH值缓冲液中，bis-PNA与靶序列反应引起的相位变化有明显差异（P〈0．01），pH6．6与pH6．8时传感器响应...
目的建立改进性二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine，DEN）诱发大鼠原发性肝癌模型，探讨肝癌形成过程的病理变化特点。方法用1‰DEN溶液间断喂养Wistar大鼠诱发肝癌，对大鼠肝脏不同诱癌阶段的病理变化和超微结构进行动态观察。结果16周以后诱癌组大鼠成癌率为96％（24／25），大鼠肝癌癌变过程大致经过肝细胞损伤期、肝细胞增生硬化期和肝细胞...
目的探讨缺氧调节基因／产物在CoCl2化学缺氧预处理抵抗神经型细胞缺氧损伤中的作用。方法分化的SH—SY5Y细胞分为对照组、化学缺氧预处理组（细胞先用50μmol／LCoCl2预处理3h，换液后常氧培养1h，然后在2％的低氧孵箱内缺氧28h）、缺氧组（2％的低氧孵箱内缺氧28h）。RT-PCR测VEGF、GLUT-1、EPO、LDH-A的mRNA表达。通过应用重组人VEGF纯品，进...
目的探讨大鼠脓毒症中循环内皮细胞（circulating endothelial cells，CEC）数量的变化及其与肝功能改变的关系。方法利用盲肠结扎穿孔模型（CLP）在大鼠制作脓毒症模型。观察CEC数量、白细胞数量的变化、以及肝组织病理组织学、血天冬氨酸转氨酶（AST）和丙氨酸转氨酶（ALT）的改变。并探讨CEC数量与AST和ALT的相关关系。结果CLP6h后动物肝细胞...
目的观察急性白血病骨髓基质细胞（acute leukemia bone marrow stromal cells，ALBMSCs）经腺病毒介导的间隙连接蛋白43（Cx43）基因修饰后Cx43基因表达的变化以及对细胞间隙连接通讯（GJIC）功能的影响。方法用重组腺病毒Ad—Cx43-GFP转染ALBMSCs，荧光显微镜观察报告基因GFP的表达并计算转染效率，RT-PCR法、Western blot法和免疫细胞化学法...
目的观察青藤碱（sinomenine，SN）对类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）患者成纤维样滑膜细胞（fi—broblast—like synoviocytes，FLS）凋亡及增殖的影响，为青藤碱在临床上的应用提供实验依据。方法光镜和荧光显微镜观察FLS形态的变化，流式细胞仪检测细胞凋亡率，MTT比色法检测SN对FLS生长的抑制作用。结果光镜及荧光显微镜下可见核...
目的观察神经元特异性烯醇酶（neuron-specific enolase，NSE）和骨形成蛋白4（bone morphogenic protein4，BMP4）基因在戊四氮（pentylenetetrazol，PTZ）点燃癫痫大鼠海马中的表达，并探讨两者与癫痫发病机制和脑损伤的关系。方法将50只成年雄性SD大鼠分为对照组和实验组。实验组采用PTZ点燃癫痫大鼠，按点燃进程，又随机分为Ⅰ级组、Ⅲ级组...
目的探索人毛囊细胞构建的双层皮肤替代物的组织学特征。方法用毛乳头细胞、真皮鞘细胞分别与外根鞘细胞构建复合壳多糖双层皮肤替代物，分析其体外和移植至大白鼠后的组织学特征。结果毛囊来源细胞构建的皮肤替代物中表皮细胞排列更紧密、角化突出，真皮内可见与表皮相连的上皮细胞柱及球形膨大细胞团形成。结论毛囊细胞是构建皮肤替代物的良好...
目的观察自行研制的抗肿瘤制剂诺帝（Nordy）对三维胶原体外培养条件下恶性胶质瘤细胞诱导ECV304细胞血管生成的抑制作用。方法采用不同浓度、不同时相点给药；观测在恶性胶质瘤细胞系SHG-44诱导ECV304细胞生长和小管样结构形成的过程中，ECV304细胞增殖周期、凋亡率以及小管样结构形成数目、大小等指标。比较诺帝对SHG-44细胞诱导ECV304细胞形...
目的观察高糖培养条件及牛磺酸干预视网膜Mueller细胞的凋亡变化，探讨牛磺酸对早期糖尿病视网膜Mueller细胞的保护作用。方法取出生后3d的SD大鼠视网膜，分离纯化培养视网膜Mueller细胞；经预实验选取25mmol／L葡萄糖作为高糖培养条件，实验分为6组：正常组；高糖＋0．1mmoL／L牛磺酸组；高糖＋1mmoL／L牛磺酸组；高糖＋5mmol／L牛磺酸组；高糖...
目的研究风湿性心脏病慢性房颤患者心房肌细胞ELK-1、p-ELK-1的表达，探讨房颤发生与ELK-1、p-ELK-1表达之间的关系。方法12例风心病换瓣患者分为2组：①慢性房颤组（6例）房颤持续时间均〉6个月，②窦性心律组（6例）为正常心律。手术中切取少许右心房游离壁组织采用免疫组化和间接免疫荧光技术检测心房肌ELK-1、p-ELK-1的表达与分布。结果①免...
目的探讨2，3，7，8-四氯二苯-对-二噁英（TCDD）对B淋巴细胞株CH12．LX的抗体分泌功能的毒性效应，及其可能的受体机制。方法以B淋巴细胞株CH12．LX为细胞模型，以ELISA法检测系列浓度TCDD处理对LPS活化CH12．LX的IgM分泌功能的影响，以RT—PCR和Western blot法检测CH12．LX细胞内芳香烃受体（AhR）的表达水平，以及TCDD对细胞色素P450Cyplal的...
目的探索绒毛组织滋养层细胞原代培养、纯化的有效方法及最佳转染方法。方法分离妊娠7周内的人工流产胚胎的绒毛组织进行滋养层细胞的培养和纯化。用细胞免疫化学方法对培养细胞进行鉴定；用MTF实验方法绘制滋养层细胞的生长曲线；用细胞贴壁率找到最适pH；用细胞存活分数评价转染的最佳脂质体用量。结果成功寻找到滋养层细胞原代培养和纯化的有...
目的研究FAM样酪氨酸激酶3（FLT3）靶向RNA干扰对急性髓细胞白血病细胞株THP—1的细胞增殖和周期的作用，探讨其可能的机制。方法体外转录合成FLT3靶向短发夹状干扰RNA（FLT3-shRNA），转染THP-1细胞；CCK-8法检测增殖抑制率、绘制增殖曲线，流式细胞法测细胞周期，半定量RT—PCR及Western blot测干扰前后cyclin D1和cyclin A的mRNA、蛋白水平的...
室性心律失常是心瓣膜置换术后常见并发症之一。一旦发生恶性室性心律失常，如心室颤动（室颤），死亡率很高。因此，对瓣膜置换术后室颤的积极抢救有重大的意义。我科已开展心脏外科手术上万例，但在心脏手术后发生多次室颤并抢救成功的仅此1例。现将成功救治这例双瓣置换术后重症监护中4次室颤的体会报告如下。
目的建立逆转录病毒介导的人Notch1基因RNA干扰体外表达体系并观察对恶性脑胶质瘤细胞的作用。方法将人Notch1基因RNAi双链转录DN段重组到逆转录病毒质粒Psilencer5．1-H1 Retro中，构建成携带人Notch1基因RNAi逆转录病毒载体pSiRNA-Notch1，经PT67细胞包装后，产生的重组逆转录病毒感染U251和CHG-5恶性脑胶质瘤细胞，用WST-8、RT—PCR和Western...
目的探讨TIMP-3在移植物慢性排斥反应血管病变中的作用。方法在大鼠移植段主动脉转染TIMP-3质粒，利用免疫组织化学法测定移植段腹主动脉内MMP-1，2、TIMP-3表达；Northern杂交分析MMP-2表达；酶图分析术后MMP-2的活性。结果①同系移植组MMP-1，2、TIMP-3表达均较低；异系移植组MMP-1，2、TIMP-3表达显著增加。②转染TIMP-3的异系移植组术后1、2...
购物车(0)