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整合素β1基因剔降血管内皮细胞株的建立及其增殖活力研究

梁光萍; 苏踊跃; 陈建; 闫德雄; 陈卫; 王秀亮; 罗向东 第三军医大学学报 2007年第12期

摘要:目的构建人整合素(integfin)β1基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pGenesil—integrinβ1),建立integrinβ1剔降血管内皮细胞株,观察integrin β1对EA.hy926细胞株增殖的影响。方法合成integrin β1 siRNA模板,经退火后插入到pGenesil—1荧光载体。阳性重组质粒经DoTAP转染至EA.hy926细胞中。蛋白印迹观察pGenesil-integfinβ1表达载体对目的蛋白integrinβ1表达的抑制效率,绘制转染基因前后细胞生长曲线。结果经酶切、测序验证。pGenesilintegfinβ1重组质粒构建成功。转染细胞后,可明显抑制integrinβ1的表达。整合素β1基因剔降血管内皮细胞株细胞增殖减慢,与EA.hy926细胞株相比,生长曲线右移。结论成功构建了pGenesil-integrinβ1重组质粒,建立了integrinβ1下调细胞株,下调integrinβ1表达对血管内皮细胞增殖产生负调控作用。

关键词:rna干扰血管内皮细胞

单位:第三军医大学西南医院全军烧伤研究所; 创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室; 重庆400038

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