摘要:杉木(Cunninghamia lanceolate (Lamb.) Hook.)是中国南方特有的速生用材树种,其组织富含多酚多糖,RNA提取非常困难,特别是对于微量组织尤为明显。根据杉木的特点,本研究采用改良CTAB法,优化试剂用量,用冰取代液氮研磨样品,研究比较了杉木不同微量组织总RNA提取效果。研究结果表明,本方法可从起始量为100 mg、50 mg、25 mg和10 mg的杉木茎、叶、花、根组织中得到高质量总RNA,其中100 mg叶中得到总RNA的浓度最高为223.5 ng/μL,A260/280为1.86,而10 mg根中得到总RNA浓度为29.6 ng/μL,A260/280为1.64。经琼脂糖凝胶电泳检测,所提总RNA条带清晰无拖尾,产量高、质量较好。进一步反转录后,利用特异引物进行扩增验证,发现扩增的片段条带清晰,得率高,片段大小符合预期。该结果为提取杉木微量组织总RNA提供参考,为推动杉木微量组织在转录水平上的研究提供了科学依据。
关键词:lanceolate 微量组织 rna提取 改良ctab法
单位:福建农林大学林学院; 福州350002; 国家林业局杉木工程技术研究中心; 福州350002
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