摘要：目的观察原核表达、制备小鼠可溶性Fas用于抑制活化诱导的脾细胞凋亡的效果。方法通过RT-PCR从小鼠胸腺中扩增可溶性Fas基因，克隆至原核表达载体pET-28a（＋），构建pET-sFas重组质粒，转化大肠杆菌BL21，经异丙基伊胁硫代半乳糖苷（IPTG）诱导后获得高表达的可溶性Fas。经镍柱亲和层析纯化后用于抑制刀豆素A（ConA）刺激下的脾细胞活化诱导凋亡。结果基因测序、Western-blot鉴定证实为可溶性Fas的原核表达蛋白，该蛋白能抑制小鼠脾细胞在ConA刺激下发生的凋亡[对照组凋亡率（70．3±4．9）％和实验组凋亡率（8．5±0．4．35）％有极显著差异（P〈0．01）]。结论原核表达的可溶性Fas能够抑制小鼠脾细胞在ConA刺激下发生凋亡，为进一步抑制活化的T淋巴细胞凋亡及体外大量制备抗原特异性T细胞提供思路。

关键词：可溶性fas 原核表达 抑制 凋亡 

单位：华中科技大学同济医学院免疫学系 武汉430030