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濒危植物长叶红砂ISSR扩增条件的优化与引物筛选

王玉山 张颖娟 内蒙古师范大学学报·教育科学版 2008年第03期

摘要:对濒危植物长叶红砂(Reaumuria trigynaMaxim)的核基因组DNA进行ISSR扩增条件的优化与引物筛选.利用单因素实验,测试了ISSR-PCR反应体系中模板DNA的含量、引物浓度、Master Mix等因素对反应结果的影响,经过优化实验,建立了长叶红砂ISSR-PCR的最佳反应体系,15μL PCR反应体积包括Mix4.5μL,模板DNA 20 ng,引物0.6μmol/L.利用优化反应体系,从60个ISSR引物中筛选出稳定性好、重复性高的14个引物.对长叶红砂5个种群的85个个体进行扩增,共扩增出110个位点,其中多态位点102个,多态位点百分率为92.73%.长叶红砂ISSR反应体系的建立为利用ISSR分子标记技术进一步研究长叶红砂的遗传多样性奠定了良好的基础.

关键词:濒危植物长叶红砂issr扩增条件优化引物筛选

单位:内蒙古师范大学生命科学与技术学院 内蒙古呼和浩特010022

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