摘要：以烟台红富士为原料,研究膜结合态多酚氧化酶（m PPO）的分离纯化条件,采用非离子型去污剂结合热诱导方法粗提,硫酸铵分级沉淀,DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱层析方法对m PPO进行纯化,并对其进行串联质谱（LC-MS/MS）分析鉴定。结果表明m PPO提取纯化最佳条件为：超声提取10 min,50%～80%饱和度硫酸铵沉淀,0.1 mol/L Na Cl梯度洗脱。纯化后的m PPO纯度提高了64.30倍,比活力高达387 032.97 U/mg。纯化后的m PPO经SDS-PAGE和Native-PAGE分析均为单一蛋白带,且为亚基分子量67 k Da的二聚体。经串联质谱分析及蛋白数据库鉴定此纯化蛋白为多酚氧化酶。

关键词：富士苹果 多酚氧化酶 分离纯化 膜结合态 离子交换柱层析 

单位：中国农业大学食品科学与营养工程学院 北京100083