摘要:用RT-PCR法扩增前列腺癌组织标本中的前列腺特异膜抗原(PSMA)cDNA序列。并将其克隆至真核表达载体pcDNA3.0。用脂质体转染法将pcDNA3.0-PSMA转染哺乳动物细胞,鉴定PSMA蛋白表达。序列测定结果表明,两条引物间的片断长度为2279bp,与预期长度一致;将克隆的编码区序列与Genebank的PSMA序列进行Blast对比分析,同源性为99.7%;间接免疫荧光法显示表达的蛋白质为膜蛋白,免疫印迹表明表达蛋白质的相对分子质量为100kD。提示成功扩增了PSMA编码区序列,构建了PSMA真核表达载体,建立了PSMA稳定表达的细胞株;此研究为PSMA基因修饰的树突状细胞疫苗治疗前列腺癌奠定了基础。
关键词:前列腺特异膜抗原 癌基因 前列腺肿瘤
单位:临沂市人民医院; 山东临沂276003
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