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大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和外源基因的导入

王晓军; 崔连群; 李季; 王敏; 刘继东 山东医药 2007年第02期

摘要:目的探讨绿色荧光蛋白基因转染骨髓间质干细胞的可行性。方法采用Ficoll—Paquea^TM Plus淋巴细胞分离液,根据细胞密度梯度原理,分离大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)并进行体外原代培养和传代扩增,倒置相差显微镜观察细胞生长情况,免疫细胞化学法对其初步鉴定。流式细胞仪分析转染效率。结果原代和传代培养的细胞呈现梭形外观,具有较强的生长增殖能力,细胞均一表达CD44、CD54、CD106、CD29抗原。电穿孔法转染rMSCs转染率为32.8%±3%。结论采用比重为1.077g/L的Ficoll—Paque^TM Plus能分离获得大鼠骨髓间充质干细胞,经原代培养和传代培养能够迅速扩增。电穿孔法具有较高的介导外源基因表达于rMSCs的效率。

关键词:骨髓基质干细胞细胞培养绿色荧光蛋白电穿孔

单位:山东省千佛山医院; 山东济南250014; 山东省立医院; 山东大学医学院; 山东省科技大学

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