线上期刊服务咨询,发表咨询:400-808-1701 订阅咨询:400-808-1721

慢病毒介导的CyPA基因沉默对非小细胞肺癌细胞生长的影响

冯艳铭 王琳 姚武 吴卫东 吴逸明 山东医药 2008年第12期

摘要:目的构建特异性沉默CyPA基因的慢病毒颗粒,体外观察其对非小细胞肺癌H1299细胞生长的影响。方法根据已筛选的特异性沉默CyPA基因靶序列寡核苷酸,合成一对正义反义寡核苷酸DNA,采用基因克隆技术分别插入PGCL-GFP慢病毒载体,以脂质体法将重组PGCL-GFP与病毒包装载体pHelper1.0、pHelper2.0共转染293T细胞,制备假包装病毒颗粒(Lv-shCyPA)并感染非小细胞肺癌H1299细胞,4d后采用RT-PCR、Western-blot及MTT分别检测CyPA基因mRNA、蛋白表达水平及H1299细胞增殖状态。结果构建的LV-shCyPA慢病毒颗粒感染H1299细胞,CyPA mRNA及蛋白表达显著下调,H1299细胞生长明显减缓,与未转染病毒、阴性对照病毒转染的H1299细胞比较有显著差异(P〈0.05)。结论成功构建了沉默CyPA基因慢病毒载体,其产生的假包装病毒颗粒能特异地沉默CyPA基因,抑制H1299细胞增殖,提示CyPA可能在非小细胞肺癌的发生发展中发挥一定的作用。

关键词:rna干扰cypa基因慢病毒肺肿瘤

单位:郑州大学公共卫生学院 河南郑州450052

注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社

山东医药

统计源期刊

¥580.80

关注 42人评论|9人关注