摘要：目的研究吉西他滨体外对人胰腺癌AsPC-1细胞生长的作用机制。方法用脂质体转染法将p53正向凋亡调控因子（PUMA）反义核酸（反义PUMA cDNA）的真核表达载体pcDNA3．1-PUMAAS和空载体pcDNA3．1-导入AsPC-1细胞，G418筛选阳性细胞，获得稳定转染的阳性克隆。将转染载体的AsPC-1阳性克隆细胞和未转染载体的AsPC-1细胞分别暴露于浓度1、5、10和15μmol／ml的吉西他滨中作用72h。RT—PCR和Western blotting检测不同组细胞经吉西他滨作用72h后的PUMA表达；MTT检测细胞生长抑制，流式细胞仪（FCM）、Hoechst33258荧光染色法和TUNEL法检测细胞凋亡。结果吉西他滨促进AsPC-1细胞凋亡，抑制细胞生长，并有明显的剂量依赖性，在细胞凋亡的同时伴有PUMA表达的上调；当细胞转染PUMA反义核酸抑制PUMA表达后，受吉西他滨作用的细胞出现PUMA蛋白表达明显降低，同时伴有细胞凋亡的抑制及细胞的明显增殖。结论吉西他滨促进体外AsPC-1细胞凋亡，并抑制其生长，其诱导凋亡与上调PUMA有关。

关键词：胰腺肿瘤 吉西他滨 细胞凋亡 p53正向凋亡调控因子 

单位：海南医学院附属医院 海口527101 苏州大学第一附属医院