摘要：目的构建带有流感病毒血凝素9钛表位标签（HA标签）的乙型肝炎病毒（HBV）核心蛋白（HBc）的表达质粒，为进一步研究HBe蛋白基因的功能奠定实验基础。方法设计并合成扩增HBc蛋白全长的PCR引物，以野生型的HBV质粒pDolTHBV-1为模板，PCR扩增全长的HBc蛋白，大小为563bp；PCR产物经过Eco砒和XholI酶切后，与线性化的pcDNA3／HA载体连接后转化大肠杆菌，扩增、纯化获得所需质粒，以琼脂糖凝胶电泳、酶切鉴定以及基因测序鉴定其分子质量和插入片段的序列；构建的质粒转染HEK293细胞48h后，RIPA裂解细胞，Western blot检测HBc蛋白表达。结果纯化质粒的相对分子质量为5．9kb，酶切鉴定结果符合目的条带（563bp）大小，插入的寡核苷酸序列与野生型HBV基因序列完全相符，表达的融合蛋白大小为28kDa。结论成功构建了带有HA标签的HBc蛋白的真核表达质粒pcDNA3／HA—HBc蛋白，为进一步研究HBe蛋白的功能奠定了良好的实验基础。

关键词：质粒 乙肝病毒核心蛋白 基因 表达 

单位：华北煤炭医学院生物科学系 河北唐山063000 天津医科大学天津市生命科学中心实验室