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慢病毒转染YFP基因在视网膜干细胞中的表达及变化

蒋慧中 张旭乡 关云谦 刘大川 山东医药 2010年第32期

摘要:目的探讨慢病毒转染基因在视网膜干细胞(RSC)中表达的稳定性及对RSC细胞分化的影响。方法从出生1 d的小鼠眼中分离、培养RSC。用携带黄色荧光蛋白(YFP)的猫免疫缺陷病毒(FIV)转染RSC,分析YFP在分化和未分化RSC中的表达情况;用5溴脱氧尿苷(BrdU)标记正在进行有丝分裂的细胞,分析在慢病毒转染基因在RSC及其分化细胞的不同标记物表达。结果在RSC中FIV转染的YFP可长效表达53 d(传10代),表达水平未明显衰减。转染YFP后RSC仍可呈克隆生长,YFP在BrdU阴性的分化细胞中迅速下调。结论慢病毒转染的YFP基因可以在RSC中长期稳定的表达,但随RSC的分化YFP的表达水平显著下降。

关键词:干细胞移植基因沉默慢病毒属免疫缺陷病毒

单位:首都医科大学宣武医院 北京100053

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