目的探讨慢病毒载体介导的RNA沉默CD55基因抑制胰腺癌BxPC-3细胞迁移、侵袭和成瘤的效果及机制。方法采用CD55-RNAi-LV（慢病毒包装靶向抑制CD55的shRNA载体）转染BxPC-3细胞（实验组）,设转染NC-GFP-LV（慢病毒包装作对照的空载体）的BxPC-3细胞为对照组,未转染的BxPC-3细胞为空白组。Transwell法检测各组细胞体外迁移、侵袭能力。三组细胞分别...
目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对人胃癌BGC-823细胞的促凋亡作用及钙稳态失衡对该作用的影响。方法对体外培养的BGC-823细胞采用EGCG干预。采用MTT比色法检测细胞活性;光镜、倒置显微镜观察细胞形态变化;DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况;流式细胞光度仪分析细胞内游离钙水平。结果 EGCG作用后BGC-823细胞核染色质固缩,核碎裂,凋...
目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）、尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）及其受体（uPAR）与胃癌侵袭、转移的关系及其相关性。方法采用免疫组化SP方法检测198份胃癌组织标本（胃癌组）、60份正常胃黏膜组织标本（对照组）VEGF、uPA、uPAR表达。结果与对照组比较,胃癌组VEGF呈高表达,并与浸润深度、淋巴结转移和临床分期呈正相关,与肿瘤的分化程度呈...
目的探讨磷酸化ERK（P-ERK）、TGF-β受体Ⅱ（TβRⅡ）和磷酸化Smad2（P-Smad2）蛋白在食管癌发生、发展中的作用。方法采用Western blot技术检测38份手术切除的食管癌标本和12份癌旁组织标本中P-ERK、TβRⅡ、P-Smad2蛋白表达。结果食管癌组织中TβRⅡ、P-Smad2蛋白表达明显低于癌旁组织,P-ERK蛋白表达明显高于癌旁组织,P均〈0.05;P-ERK、TβRⅡ、P-...
目的探讨苦参素注射液（MI）联合顺铂（DDP）对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡相关基因c-myc、bcl-2和bax表达的影响。方法分别采用MI、顺铂及MI联合顺铂干预SMMC-7721细胞。TUNEL法检测细胞凋亡率,半定量RT-PCR法检测c-myc、bcl-2和bax mRNA表达,二步法免疫组化检测c-myc、bcl-2和bax蛋白表达。结果苦参素组、顺铂组和联合用药组细胞凋亡率显著上升,...
目的探讨Notch1信号通路对体外培养的胃癌细胞（BGC-823）增殖的影响,为胃癌的治疗提供新思路。方法将体外培养的胃癌细胞株BGC-823分为三组,空白组加入PBS缓冲液,激活剂组加入Notch1通路激活剂rh-NF-κB,抑制剂组加入Notch1通路抑制剂γ-secretase inhibitorⅡ。Western blot法检测各组Notch-1和Hes-1蛋白表达;MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪...
目的探讨p53、PTEN、VEGF表达在胃癌发生、发展中的作用及其相关影响因素。方法采用免疫组织化学法检测80份胃癌组织中p53、PTEN、VEGF表达,并分析其与胃癌临床病理特征的关系。结果 p53、PTEN、VEGF在胃癌组织中的阳性表达率依次为55%（44/80）、92.5%（74/80）、52.5%（42/80）;胃癌组织中p53、VEGF表达阳性率明显高于对照组,P〈0.01。三者表...
目的探讨胰腺癌患者血清CA242与癌组织Ki-67表达的相关性。方法对35例胰腺癌手术患者术前行血清CA242水平检测;术中取癌组织采用免疫组化法检测Ki-67表达;分析二者的相关性。结果 35例患者血清CA242水平均显著升高,对胰腺癌诊断的敏感性和特异性分别为68.6%（24/35）和77%（77/100）。胰腺癌组织中Ki-67表达阳性率（71.4%）明显高于正常胰腺组织...
目的探讨真菌菌株PH0016的胞外多糖（EPS）抗单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV-1）的活性及机制。方法对分离自海南红树林的一株真菌菌株行菌株鉴定和ITS序列分析;对其产生的EPS行体外、体内细胞毒性实验和抗HSV-1作用观察。结果菌株初步鉴定为淡紫色拟青霉菌。EPS可抑制HSV-1病毒活性,其对HSV-1感染细胞病变的半抑制浓度（IC50）为195μg/mL,SI为11.45。EP...
目的探讨高尔基体糖蛋白73（GP73）表达诊断肝癌的价值。方法采用免疫组织化学染色SP法检测60份肝癌组织、癌旁组织及24份正常肝组织中GP73表达;分析GP73表达与肝癌临床病理特征的关系。结果肝癌组织、癌旁组织GP73阳性率显著高于正常肝组织（P〈0.05）。GP73表达与Child-Pugh分级呈正相关（P〈0.05）,在肝外转移和HBV感染中表达亦显著增强（P〈...
目的探讨蛋白激酶C（PKC）及K-ras蛋白在结直肠癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化法分别检测76份结直肠腺癌组织（腺癌组）、15份结直肠腺瘤组织（腺瘤组）及10份正常结直肠黏膜（正常组）中PKC-a及K-ras蛋白表达,分析两者的相关性及其与肿瘤临床病理特征的关系。另采用Western blot法检测30份结直肠癌黏膜组织和10份癌旁黏膜组织（距肿瘤...
目的探讨Notch1和Jagged1蛋白在大肠腺癌发生发展的作用。方法采用免疫组织化学PV-9000法和Western blotting法检测78份大肠腺癌组织（大肠癌组）,40份大肠腺瘤组织（腺瘤组）及40份正常大肠组织（距大肠腺癌组织远端5㎝,正常组）Notch1与Jagged1蛋白表达情况,分析其与大肠癌临床病理参数的关系。结果大肠癌组Notch1、Jagged1蛋白阳性率明显高于...
目的探讨CC趋化因子受体7（CCR7）和黏附分子L-选择素在大肠癌组织中的表达及二者与大肠癌淋巴转移的关系。方法采用免疫组织化学方法检测63份大肠癌组织（大肠癌组）、44份癌旁正常组织（癌旁组）和31份转移灶组织（转移组）中CCR7和L-选择素的表达。结果大肠癌组、转移组CCR7、L-选择素阳性率明显高于癌旁组（P〈0.01）;CCR7与L-选择素表达显...
目的探讨eIF4E在肝癌发生发展过程中的作用。方法采用免疫组织化学S-P法检测62份肝癌组织及癌旁硬化肝组织、15份正常肝组织中eIF4E蛋白的表达情况,并分析eIF4E表达与肝癌临床病理特征的关系。结果肝癌组织中eIF4E阳性表达率显著高于癌旁硬化肝组织及正常肝组织（χ2=29.37,P〈0.001）,其表达与患者年龄、性别、肿瘤大小及包膜的完整程度无关,与...
统计学分析方法的选择：对于定量资料,应根据所采用的设计类型、资料所具备的条件和分析目的,选用合适的统计学分析方法,不应盲目套用t检验和单因素方差分析;对于定性资料,应根据所采用的设计类型、定性变量的性质和频数所具备的条件以及分析目的,选用合适的统计学分析方法,不应盲目套用χ2检验。对于回归分析,应结合专业知识和散布图,选用合适的...
目的探讨p75NTR阳性人食管鳞癌细胞的干细胞特性。方法取15例新鲜人食管鳞癌组织制成单细胞悬液,分别获取p75NTR阳性和p75NTR阴性细胞,进行Transwell侵袭试验、耐化疗药物试验及裸鼠成瘤试验。结果15例新鲜人食管鳞癌组织中有7例发现p75NTR表达,其阳性表达率最高为10.37%,p75NTR阳性和p75NTR阴性细胞在侵袭性、对化疗药物的耐受能力及致瘤能力上...
目的探讨RGS17在原发性肝癌（HCC）发生发展中的作用。方法采用real-time PCR法检测正常肝细胞株THLE-2和肝癌细胞株HepG2、HuH7中RGS17 mRNA表达。结果 HepG2和HuH7细胞中RGS17 mRNA水平明显高于THLE-2细胞,P〈0.05。结论 RGS17在HCC的发生发展中可能起促进作用;其具体机制尚需进一步研究。
目的探讨转染核因子-κBp65（RelA）反义寡核苷酸（RelA AsODN）调节胰腺癌细胞对阿霉素敏感性的效果及机制。方法采用RelA反义寡核苷酸和对照序列转染胰腺癌细胞株Capan-2。MTT法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR法检测RelA AsODN作用后凋亡相关基因bcl-xL表达变化。结果 10μg/mL阿霉素单独及其与RelA AsODN联合作用24 h后的细胞存...
目的探讨华蟾素对人胃癌细胞SGC-7901生长和增殖的影响。为其临床应用奠定基础。方法应用细胞培养技术,将不同浓度的华蟾素在一定的时间内体外干预SGC-7901细胞。分别采用MTT法、克隆形成试验、流式细胞技术（FCM）测定细胞生长、增殖情况和细胞周期变化。结果 SGC-7901细胞经华蟾素作用后细胞生长明显受抑,最高抑制率为（78.36±3.43）%;SGC-790...
目的探讨转录信号传导子与激活子-3（Stat3）及CyclinD1、p53、c-fos在食管癌发生发展过程中的作用及意义。方法采用免疫组化方法检测100份食管癌组织及60份正常食管黏膜组织中Stat3、CyclinD1、p53及c-fos蛋白的表达情况。结果 Stat3蛋白在正常食管黏膜、食管癌组织中的阳性表达率分别为6.7%、94.0%,P〈0.05;食管癌组织CyclinD1、p53、c-fos蛋...
目的分析丙氨酸氨基转移酶（ALT）正常的慢性乙型肝炎（CHB）患者肝组织学改变与其临床特点的关系。方法回顾性分析245例ALT正常的CHB患者临床资料,分析患者年龄、性别、HBeAg阳性与否、HBV-DNA定量与肝组织学改变的关系。结果肝组织学病变程度为G2和S2以上者分别为179例（73.1%）和176例（72.8%）;肝组织学病变程度与年龄存在相关性（炎症分级...
目的探讨急性胰腺炎（AP）患者外周血单个核细胞p38MAPK基因表达及其与疾病严重程度的关系。方法采用实时荧光PCR法检测29例轻型胰腺炎（MAP）患者（MAP组）、23例重症胰腺炎（SAP）患者（SAP组）及21例查体健康者（对照组）外周血单个核细胞（PBMC）p38MAPK mRNA表达水平,Western blot法检测PBMCp38MAPK和磷酸化p38MAPK（P-p38MAPK）蛋白表达水...
目的分析乙型肝炎患者HBV核苷（酸）类似物耐药相关的10个位点的突变情况及其临床意义。方法采用焦磷酸测序法对658例各型乙型肝炎患者行核苷类似物抗乙肝病毒多位点耐药基因检测并分析不同核苷（酸）类似物耐药的突变形式,对常见突变模式者ALT和HBV-DNA水平进行比较。结果 300例发生不同位点变异,变异率为45.59%,其中有明确用药史者202例。拉米...
目的探讨中晚期原发性肝癌（HCC）患者介入治疗前后T淋巴细胞亚群和红细胞免疫功能变化特点。方法对40例原发性肝癌患者（观察组）及40名正常体检者（对照组）采用微量全血直接免疫荧光法检测T淋巴细胞亚群,采用受体黏附法检测红细胞免疫功能。结果观察组总T细胞（CD3＋）、辅助/诱导T淋巴细胞（CD4＋）、CD4＋/CD8＋和肿瘤红细胞花环（DTER）、...
目的探讨实时组织弹性成像（RTE）弥散定量分析技术评价正常人肝脏弹性的临床价值。方法研究对象为213例健康体检者,男、女分别为116、97例;按年龄分为青年组（〈30岁）78例、中年组（31～60岁）75例、老年组（〉60岁）。所有受检者均予常规超声检查后再行RTE检查,并行组织弥散定量分析,于肝包膜下1 cm处测量感兴趣区域（ROI）内肝组织弹性定量...
目的探讨HBV基因型对阿德福韦酯的抗病毒治疗效果的影响及HBV耐药变异情况。方法对应用阿德福韦酯初治的336例慢性乙型肝炎（乙肝）患者治疗前行HBV基因分型检测;治疗48周和96周分别对临床疗效及HBV耐药变异率进行比较。结果治疗48周B基因型HBV感染者（B基因型）血清HBV-DNA均值较基线下降幅度及血清HBV-DNA转阴（血清HBV-DNA〈1×103copies/mL）...
目的探讨microRNA21在胃癌发生发展中的作用。方法采用茎环实时定量PCR法检测117份胃癌组织标本和癌旁正常组织标本中microRNA21的表达水平;分析其与胃癌临床病理因素的关系。结果 microR-NA21在胃癌组织中相对表达水平显著高于癌旁正常组织（P〈0.000 1）。相关分析显示,microRNA21高表达与胃癌临床分期、浸润深度、分化程度及淋巴结转移呈正相...
目的探讨自身抗体在乙型肝炎发生和发展中的作用。方法收集肝功能明显异常的115例乙肝患者、60例健康体检者（正常对照）的血清标本,采用间接免疫荧光法（IIF）检测抗核抗体（ANA）、抗平滑肌抗体（SMA）;免疫印迹法检测抗线粒体抗体（AMA）、抗肝肾微粒体抗体（LKM）;实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA水平。结果对照组、乙肝组、肝硬化组及肝癌组...
目的探讨环氧合酶-2（COX-2）、细胞角蛋白20（CK20）在胃癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组织化学ABC法观察290份胃黏膜标本（34份浅表性胃炎组织（胃炎组）、130份胃癌前病变组织[萎缩性胃炎伴肠上皮化生45份、异型增生85份（轻中度增生68份、重度增生17份）]、126份胃癌组织（胃癌组）中COX-2和CK20表达。结果从浅表性胃炎、萎缩性胃炎伴...
目的探讨大肠癌术中5-氟尿嘧啶（5-Fu）缓释剂间质化疗的安全性。方法将190例大肠癌根治术患者分为治疗组94例和对照组96例。治疗组手术结束关腹前将5-Fu缓释剂600 mg均匀置于肿瘤病灶区域和淋巴血管回流区域;对照组术中不用化疗药。两组术后处理相同。术前及术后第2、12天检测两组白细胞和红细胞计数、血清ALT、Cr及CD4＋/CD8＋值,观察不良反应...
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