摘要:目的应用RNAi(RNAinterference)技术,通过对慢性髓细胞性白血病k562细胞株nm23-H1基因表达的抑制,初步研究nm23-H1基因对k562细胞株侵袭和增殖的影响。方法构建真核表达载体nm23-H1的RNAi重组体pGCsinm23(以下简称pGCsinm23),转染k562细胞株(转染组);设转染对照质粒的K562细胞为对照组。采用RT-PCR和Westernblot法分别检测两组转染前后nm23-H1mRNA及其蛋白质表达;采用平板克隆试验、软琼脂克隆形成试验和侵袭小室穿透试验观察转染前后细胞生长、增生能力以及体外侵袭能力的差异。结果pGCs—inm23构建成功。转染组电泳结果显示nm23—1mRNA和蛋白表达水平明显下降;与对照组比较,细胞生长速度加快,克隆形成率明显增高,软琼脂中细胞形成的集落体积增大且形成数量明显增多;穿膜细胞数亦明显增多(P〈0.05)。结论pGCsinm23可有效抑制K562细胞中rim23-H1的表达;nm23-H1基因可抑制白血病细胞增殖且对其侵袭能力有抑制作用。
关键词:nm23 k562细胞 白血病 细胞侵袭 rna干扰
单位:复旦大学附属华山医院南汇分院 上海201399 复旦大学附属上海市浦东医院
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