摘要：目的 构建大鼠糖皮质激素受体（GR）基因到Ad5/F35型腺病毒载体并鉴定.方法 将pcDNAl Neo-Rat GR的质粒经酶切获得Rat GR cDNA酶切片段,与载体质粒pDC316的酶切片段一同转染到感受态大肠杆菌DH-5α中,构建重组穿梭载体pDC316-GR;进行PCR、酶切、测序鉴定,确定构建成功后与腺病毒骨架质粒Ad5/F35一同转染到293细胞进行同源重组,得到Ad35-GR毒种,并进行PCR鉴定.结果 经酶切、PCR方法鉴定构建了大鼠GR的重组腺病毒,氯化铯梯度离心纯化最终获得2.8×1011 PFU/mL滴度的重组病毒.结论 成功构建了大鼠GR的高滴度重组腺病毒.

关键词：糖皮质激素受体 腺病毒 载体 转染 大鼠 

单位：南京市江宁医院 南京211100 南京医科大学第一附属医院