摘要：目的 以氯通道蛋白ClC-3为靶蛋白,建立一种不溶血的红细胞免疫荧光细胞化学检测方法.方法 采集大鼠红细胞,涂片,0.5％丙烯醛/PBS固定,以不同浓度的Triton X-100/PBS（含0.1mol/L甘氨酸）溶液透膜,用含0.05 mmol/L甘氨酸、2％ BSA、0.05％ NaN3的PBS溶液封闭抗原,随后孵育ClC-3的一抗和荧光标记的二抗,最后在共聚焦荧光显微镜下观察结果.结果 0.1％ Triton X-100/PBS结合其他优化液处理的红细胞未出现溶血现象,共聚焦显微镜下清晰地观察到目的蛋白及其亚细胞分布情况.结论 通过优化固定液、透膜液、封闭液和洗涤液,解决了常规免疫细胞化学法导致红细胞易溶血的缺点,在确保红细胞不溶血的同时成功检测到红细胞氯通道ClC-3蛋白,即成功建立了一种不溶血的红细胞免疫荧光细胞化学检测方法.

关键词：红细胞 免疫荧光技术 免疫荧光细胞化学检测方法 氯通道蛋白 溶血 

单位：广东药学院 广州510006