摘要：目的观察受体相互作用蛋白激酶3（RIPK3）基因转染的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y中低氧诱导因子1α（HIF-1α）mRNA及其信号通路相关基因表达变化。方法构建表达RIPK3基因的p CMV6-AC-GFP质粒（重组质粒）,培养SH-SY5Y细胞,分为实验组及对照组,分别转染重组质粒和空载质粒。采用Western blotting法检测细胞中的RIPK3蛋白,分别于培养8、14、20、26、32、38 h后,通过MTT实验检测细胞增殖情况（OD值）。采用转录组测序技术（RNAseq）及Ingenuity Pathway Analysis（IPA）软件检测并筛选RIPK3-HIF1α下游信号通路中的关键基因。采用微滴式数字PCR（dd PCR）检测两组细胞中的HIF-1αmRNA。结果实验组细胞中RIPK3蛋白相对表达量（0.806±0.097 5）高于对照组（0.455±0.088 6）,P〈0.05。随培养时间延长,实验组细胞增殖受到抑制。实验组细胞中HIF-1αmRNA相对表达量（0.015 43±0.003 47）低于对照组（0.046 28±0.010 26）,P〈0.05。在HIF-1α为核心的相互作用关系网络中,筛选出关键分子泛素缀合酶样蛋白（UBC）、希佩尔-林道蛋白（VHL）、转录延伸因子B多肽1（TCEB1）、血管内皮生长因子A（VEGFA）。结论 RIPK3基因转染SH-SY5Y后,细胞中HIF-1αmRNA表达下调,同时HIF-1α信号通路相关基因（UBC、VHL、TCEB1、VEGFA）的表达水平受到影响。

关键词：神经母细胞瘤 受体相互作用蛋白激酶3 泛素缀合酶样蛋白 转录延伸因子b多肽 血管内皮生长因子a 

单位：武警后勤学院附属医院脑科医院 天津300162 武警后勤学院中心实验室 暨天津市神经创伤修复重点实验室、武警部队脑创伤与神经疾病研窍所