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1,25(OH)2D3对人肾小球系膜细胞凋亡活性的影响及机制探讨

顾杰; 张昊; 张春江; 赵丹; 刘刚; 杨晓萍 山东医药 2017年第14期

摘要:目的探讨1,25(OH)2D3对人肾小球系膜细胞(HMC)凋亡活性及凋亡相关因子表达的影响,并探讨其机制。方法体外培养HMC,随机分为空白对照组(N组)、表皮生长因子(EGF)组(E组)、1,25(OH)2D3组(V组)、EGF联合1,25(OH)2D3组(EV组)。N组在5%胎牛血清的DMEM培养基中培养,E组在DMEM培养基中加入含10 ng/m L EGF的培养液,V组加入含10-8mol/L 1,25(OH)2D3的培养液,EV组加入含10 ng/m L EGF及10-8mol/L 1,25(OH)2D3的培养液,各组均干预48 h。应用半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性试剂盒检测各组Caspase-3活性,Western blot法检测各组凋亡相关因子Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达,荧光实时定量PCR法检测各组Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 mRNA表达。结果 E组Caspase-3活性低于N组,V组及EV组Caspase-3活性高于N组,EV组Caspase-3活性高于E组(P均〈0.05)。E组p-Akt/Akt值高于N组,V组p-Akt/Akt值低于N组,EV组p-Akt/Akt值低于E组(P均〈0.05)。E组Caspase-3、Caspase-9蛋白及mRNA表达均低于N组,V组Caspase-3、Caspase-9蛋白及mRNA表达均高于N组,EV组Caspase-3、Caspase-9蛋白及mRNA表达均高于E组(P均〈0.05)。结论 1,25(OH)2D3可增强HMC的凋亡活性,从而发挥促HMC凋亡的作用,其机制可能为通过抑制Akt磷酸化,上调Caspase-3、Caspase-9的表达。

关键词:人肾小球系膜细胞1表皮生长因子细胞凋亡蛋白激酶b

单位:石河子大学医学院; 新疆石河子832003; 石河子大学医学院第一附属医院

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