摘要：目的利用蛋白质组学方法,对比经姜黄素处理和未经姜黄素处理的人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR之间差异表达的蛋白,分析与姜黄素逆转结肠癌耐药相关的蛋白。方法取结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR,分为观察组和对照组,观察组加入终浓度为25μmol/L的姜黄素作用于人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR 24 h,对照组加入等体积生理盐水。以固相p H梯度等电聚焦为第一向,垂直平板十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向（2-DE）,分离两组细胞总蛋白;通过凝胶银染显色,扫描仪GS-800采集凝胶图像,图像分析软件PDQuest8.0分析电泳图谱,寻找有意义的差异蛋白点,运用MALDI-TOF-MS系统对选取的蛋白点筛选出差异蛋白并进行质谱鉴定。结果获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的HCT-8/VCR细胞2-DE图谱。鉴定出可能与结肠癌多药耐药密切相关的10种蛋白,其中在对照组高表达的有7种,分别是谷胱甘肽S转移酶P1（GSTP1）、重组人FK506结合蛋白4（FKBP4）、X线修复交叉互补基因5（XRCC5）、肿瘤蛋白翻译调节因子1（TPT1）、热休克蛋白8（HSPA8）、超氧化物歧化酶1（SOD1）、前列腺特异性膜抗原剪接变体（PSMA5）;在观察组中高表达的有3种,分别是肽基脯氨酰顺反异构酶（PPIB）、鸟氨酸转氨酶（OAT）、核内不均一核糖核蛋白H1（HNRNPH1）。结论姜黄素干预HCT-8/VCR后出现10种差异性表达的蛋白,蛋白功能涉及信号传导、肿瘤细胞的分裂、多药耐药以及抗氧化、凋亡和糖酵解等,可能与姜黄素逆转HCT-8/VCR细胞对化疗药物的耐药性有关。

关键词：结肠肿瘤 姜黄素 蛋白质组学 双向凝胶电泳 多药耐药相关蛋白质 

单位：滨州医学院烟台附属医院; 山东烟台264000